1、技术问题：可能存在实验技术执行方面的问题，例如探针的制备或添加量不正确，导致荧光信号无法正常产生。

2、样品问题：样品可能存在处理或处理不当的问题，例如样品中存在干扰物质，或者荧光探针与样品中其他组分发生相互作用导致信号的阻尼或熄灭。

3、设备问题：荧光信号的检测设备可能存在问题，例如荧光仪器的灯泡或探测器可能损坏或不正常工作。

4、反应条件问题：可能是由于实验条件不适宜导致无法触发荧光信号的产生，例如温度、pH值或离子浓度异常等。