国足历史上最惨痛的一次失利可以追溯到2001年的亚洲区世界杯预选赛。当时，中国国家男子足球队在与伊朗队的比赛中遭遇了一场惨痛的失利，这场比赛被誉为中国足球的“黑色之夜”。

比赛发生在2001年3月28日的当天，中国国家队在自己的主场北京工人体育场迎战伊朗队。这场比赛被寄予厚望，因为中国队只需要在这场比赛中取得一场胜利，就有望晋级到2002年韩日世界杯的亚洲区决赛。

然而，比赛的结果却让中国球迷和国家队球员扼腕叹息。中国队在比赛中连丢七球，最终以0比7的惨败收场。这场失利不仅让中国队无缘世界杯，也成为了中国足球历史上最为痛苦和耻辱的一幕。

这场失利暴露了中国足球在技战术、心理素质等方面的诸多问题。国足在比赛中表现糟糕，防守漏洞百出，进攻乏力，整体实力明显不及对手。这场失利也引发了中国足球界的深刻反思和改革，促使中国足球在之后的发展中进行了一系列的改革和调整。

尽管这场失利给中国足球带来了沉重的打击，但也在一定程度上激励了中国足球的发展。中国足球在经历了这场痛苦的失败之后，逐渐开始进行技术、青训、管理等方面的改革，力求提升国家队的整体实力和水平。

2001年中国国家男子足球队在与伊朗队的比赛中遭遇的惨痛失利，被认为是中国足球历史上最为痛苦和耻辱的一次失利，也成为中国足球改革的一个转折点。