脑脊液抽取最常见的是腰椎穿刺留取脑脊液，在特殊情况下也会经脑室穿刺获取脑脊液。腰椎穿刺留取脑脊液一般会选择在腰椎的3/4或者是4/5间隙，在此穿刺比较安全。穿刺时患者采取侧卧位，低头弯腰及双手环抱屈膝，使得腰椎间隙充分打开。在选取适当位置后进行消毒、局麻、穿刺，穿刺时用腰椎穿刺针由外到内，依次经过皮肤、皮下组织、棘上韧带，棘间韧带、黄韧带和硬脊膜到达蛛网膜下腔，在此测得的脑脊液压力一般是80~180毫米水柱。