罗非鱼区分公母有两种方法：

用手握住鱼体腹部，稍用劲，肛门扩张，生殖孔，肉眼能看清的第二个孔，能随之扩张的是雌罗非鱼，不能扩张的是雄罗非鱼；在幼罗非鱼全长达5到6厘米以上的个体，可以从体外的泌尿生殖孔的数量区别，雌罗非鱼腹部的臀鳍前方有3个孔，而雄罗非鱼只有两个孔，雌罗非鱼有肛门、生殖孔和泌尿孔，雄罗非鱼的泌尿生殖孔内只有肛门和泄殖孔，泄殖孔开口于小圆柱状的白色突起的顶端，在生殖期间，此圆柱奖突起略向下垂，挤压腹部即有精液溢出。